现有的Cas9蛋白稳定表达细胞系有293T细胞和Hela细胞。这些细胞稳定表达Cas9蛋白或者Cas9Nicknase蛋白。只需要导入针对靶基因设计的gRNA就能实现基因敲除。
Cas9表达细胞系
| 货号 | 名称 | 简介 | 说明书下载 | 价格 |
|---|---|---|---|---|
| C1203 | 293T-Cas9 | 构建自293T细胞，稳定表达Cas9蛋白。嘌呤霉素筛选得到。 | 293T-Cas9.pdf | ￥3600 |
| C1204 | 293T-Cas9Nick | 构建自293T细胞，稳定表达Cas9Nickase蛋白。嘌呤霉素筛选得到。 | 293T-Cas9Nick.pdf | ￥3600 |
| C2103 | Hela-Cas9 | 构建自Hela细胞，表达Cas9蛋白。嘌呤霉素筛选得到。 | Hela-Cas9.pdf | ￥3600 |
| C2104 | Hela-Cas9Nick | 构建自Hela细胞，表达Cas9Nicknase蛋白。嘌呤霉素筛选得到。 | Hela-Cas9Nick.pdf | ￥3600 |
构建方法简介
1、pLV-Cas9-Puro（货号CR2001）或pLV-Cas9Nick-Puro（货号2003）包装为慢病毒。
2、用表达Cas9或Cas9Nicknase的慢病毒转染目的细胞。
3、嘌呤霉素筛选得到稳定表达Cas9或Cas9Nicknase的细胞株。
使用方法
Cas9或者Cas9Nick稳定表达细胞只需转入针对靶基因设计的gRNA即可实现对DNA的编辑。gRNA可以通过直接转染人工合成的RNA或者用质粒进行表达。
配套的gRNA表达质粒有：
| 货号 | 名称 | 简介 | 载体图谱 |
|---|---|---|---|
| CR2012 | pGR-Neo | gRNA表达载体，表达gRNA和新霉素抗性基因。 | pGR.pdf |
| CR2013 | pGR-Hygro | gRNA表达载体，表达gRNA和潮霉素抗性基因。 | pGR.pdf |
| CR2015 | pGR-EGFP-Neo | gRNA表达载体，表达gRNA、EGFP和新霉素抗性基因。 | pGR-EGFP.pdf |
| CR2016 | pGR-EGFP-Hygro | gRNA表达载体，表达gRNA、EGFP和潮霉素抗性基因。 | pGR-EGFP.pdf |
应用实例
Cas9蛋白稳定表达细胞系293T-Cas9对照实验