货号:CY011 MEM-EGFP稳定表达293细胞株表达人GAP43基因(GeneID:2596)N端20 AA信号肽和EGFP的融合蛋白,定位于细胞膜。该细胞株的细胞膜发出绿色荧光,可用于细胞膜定位相关实验或者细胞膜定位基因的研究。 |
细胞特性:
细胞来源:HEK293V细胞(人胚肾细胞)
表达蛋白:细胞膜定位EGFP蛋白
构建载体:pLV-MEM-EGFP(货号VL3501)
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:DMEM高糖培养基+10%FBS
细胞培养方法:
为保持细胞良好的状态,HEK293V细胞密度达50%时就需要传代。由于细胞生长迅速,一般2-3天需传代一次。
注意:及时传代对保持细胞状态极为重要。
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:4到1:5接种细胞。
pLV-MEM-EGFP(货号VL3501) 293-EGFP稳定细胞株